识别病原体和传播媒介

巴斯德接受了一项任务，调查一种蚕病，这种病正在破坏法国的丝绸工业。

巴斯德之前从未接触过蚕，他前往法国南部进行调查。不久，他就分离出了引起疾病的微生物。这项工作促进了巴斯德对传染病日益浓厚的兴趣。

卡洛斯·芬利(Carlos Finlay, 1833-1915)向哈瓦那科学院提交了一篇名为《蚊子是黄热病的传播媒介》的论文，他是第一个正确地将蚊子作为该病的最终传染源的人。然而，芬利的理论最初遭到了嘲笑。20年后，在沃尔特·里德(1851-1902)领导下工作的美国陆军科学家证明了它是正确的。

瑞士-德国病理学家埃德温·克莱伯斯(Edwin Klebs, 1834-1913)发现并描述了引起白喉的细菌。它最初被称为克莱伯斯-吕弗勒细菌。

这种细菌的棒状外观帮助克莱布斯将其与其他微生物区分开来。后来，这种细菌被称为microporon diphtheriticum，芽孢杆菌白喉，二喉杆菌，正如现在所说的，白喉杆菌。

德国细菌学家弗里德里希·吕弗勒(1852-1915)是第一个培养细菌的人白喉杆菌．

吕弗勒使用了一套我们现在知道的科赫法则来证实这一点白喉杆菌是引起白喉的病原体1884年晚些时候，吕弗勒证明了这一点c . diphtheriae产生一种毒素。这是对细菌外毒素的首次描述。(外毒素是一种由微生物排泄到周围环境中的毒素。)

当c . diphtheriae这种细菌寄生在上呼吸道，分泌一种毒素，损伤并破坏细胞。废物和蛋白质在咽部形成一层厚厚的灰色物质，称为假膜。假膜粘附在组织上，可能阻碍呼吸。同时，毒素可能会进入心脏、肌肉、肾脏、肝脏和其他部位。

科赫的假设

罗伯特·科赫和弗里德里希·吕弗勒的步骤构成了确定致病因素的基础。

1. 在每种情况下都存在微生物。
2. 微生物可以从宿主中取出并独立生长。
3. 该疾病可以通过将微生物的纯培养物引入健康的宿主来制作。*
4. 在步骤3中可以从被感染的宿主中分离和鉴定该微生物。

*步骤3的一个例外是，一些人可能会感染疾病引起的微生物，并没有显示出疾病的迹象。这些被称为无症状的载体。

意大利细菌学家Giuseppe Sanarelli(1865-1940)是该领域的著名研究者，他宣布一种杆菌是黄热病的病因。最初的调查似乎证实了这一点;然而，美国军医沃尔特·里德最终证明萨纳雷利的芽孢杆菌icteroides是继发性的入侵者，不是黄热病的原因。

由西班牙 - 美国战争的大规模黄热病有关的伤亡，由美国军队黄热病委员会成员，由沃尔特里德领导，前往古巴学习疾病。委员会成员Jesse Lazear（1866-1900）遇见了亨利罗斯卡特，这是一个研究了黄热病潜伏期的外科医生。卡特给予了衬里的衬里，他的纸稿他撰写了定义疾病的潜伏期为10至17天。据报道，Lazear表示，当他们证明是正确的，建议黄热病的生活宿主应该是莱特的日期。决心揭示疾病的来源，委员会成员访问了卡洛斯菲拉尔并决定测试他的蚊虫传播理论。

在哈瓦那的一家医院，杰西·拉齐尔孵化了芬利的蚊子卵，并让蚊子以感染黄热病的病人为食。然后，这些蚊子被允许在两周的时间里以研究志愿者为食，但没有导致感染。然而，两天后，拉齐尔再次允许蚊子进食。这一次，两个被咬的人都生病了。这些实验证实了Finlay在20年前提出的理论:蚊子(特别是埃及伊蚊品种)是黄热病的传输载体。研究人员继续排除一个细菌作为疾病药剂。他们确定不含标准细菌过滤器过滤的传染性粒子是疾病的来源：曾经发现的第一个人类病毒。（德国科学家们鉴定了1898年在动物中引起的口蹄疫的病毒。）

拉扎尔通过实验中的蚊子感染了黄热病的两名男子康复了。然而拉泽尔自己就没那么幸运了。很可能他让自己被咬是实验的一部分。拉扎尔感染了黄热病，于1900年9月去世，享年34岁。

然而，陆军的实验仍在继续，里德将新设计的设施命名为“拉齐尔营”。集团继续确定蚊子可以传播疾病只有在一段时间过去了,因为他们有美联储在另一个人类感染(12-20天的范围内),受害者被感染的蚊子咬伤通常在六天内生病。

美国陆军医疗团上校威廉·克劳福德·戈尔加斯(1854-1920)后来描述了这一发现的细节:

他们发现[一个人]，在他被黄热病蚊子咬伤之前，可以在床上睡觉，患者死于黄热病，可以用一个黄热病患者的黑呕吐物覆盖或者以任何其他方式从黄热病暴露在发射物中，只要他从蚊子叮咬保持安全，他就不会有黄热病;但是这个同样的男人，毕竟这曝光，如果之后被感染的蚊子咬伤，那么肯定会觉得患有这种疾病。

他们在营地里建了一个小框架建筑，里面装有罐子和繁殖蚊子所需的简单材料。一只雌蚊子被从隔间里拿出来孵化出来。雄性蚊子不会咬……雌性蚊子选择放入一个小玻璃管,来图一点棉花,这样她可以得到空气而不是逃跑,送往Habana,放置在一个病人的手在前三天的黄热病的攻击,并允许填满自己的血。然后她被带回到她以前的家，放在一个大玻璃罐里，让她消化她获得的血液。

......那么自信地是蚊子中的男人，我已经知道他们把手放在罐子里，让蚊子喂它们，最多在蚊子咬了一个黄热病患者之后的第五或第六天。蚊子，你回忆起，不能从12到20天传达这种疾病，从她咬了她被感染的黄热病案中传来。

另一方面，有一天，我在防蚊室看到一个由12到15名医生组成的小组，瓶子上的防蚊条不小心掉了下来，虫子跑了进来。这些医生是从其他国家来调查这一问题的，当时并不确信蚊子携带黄热病。然而，他们并不想把这件事放在他们自己身上进行实际的试验，他们离开房间的速度太快，以致于在他们离开的时候，铁丝网门被撞坏了。碰巧这个瓶子里的蚊子从来没有咬过黄热病病人，也没有被感染。

--威廉C. Gorgas，Medical Corps，美国陆军上校，关于消灭蚊子，特别是黄热病蚊子的几个一般方向

在维也纳，医学博士卡尔·兰德斯坦纳(1868-1943)和医学博士欧文·波普尔(1879-1955)宣布脊髓灰质炎的传染因子是一种病毒。

波普尔和兰德施泰纳通过仔细过滤死于小儿麻痹症的人的脊髓液，推断出小儿麻痹症的病毒性质。这种过滤器被认为能捕获细菌。当波普尔和兰德斯坦纳将过滤过的制剂注射到猴子体内时，猴子患上了小儿麻痹症。研究人员随后得出结论，这种疾病是由一种比细菌还小的传染性颗粒引起的。

脊髓灰质炎病毒本身直到20世纪50年代才被研究人员发现，当时有了电子显微镜。

在沃尔特·里德陆军研究所(WRAIR)工作期间，莫里斯·希勒曼(Maurice Hilleman)飞往密苏里州，调查军队中爆发的流感。然而，当他回到实验室时，他发现他分离出了一种全新的病毒。今天，这种病毒被称为腺病毒。儿童上呼吸道感染中有10%是由它们引起的，成人也受其影响。

腺病毒是在初步基本战斗培训期间军事学员中急性呼吸窘迫综合征的主要原因。1956年，在希尔曼的作品中建立了一个灭活的腺病毒疫苗，在20世纪70年代的其他科学家开发了一种更有效的活病毒疫苗，并从几十年中广泛使用。

在波士顿儿童医院实验室工作的医学博士托马斯·皮伯斯应实验室主任约翰·恩德斯的要求分离出导致麻疹的病毒。皮伯斯在波士顿郊外的一所私立学校得知疫情爆发，在得到校长的许可后，他采集了患病学生的血液样本，并对每个男孩说:“年轻人，你站在科学的前沿。”皮伯斯花了数周时间试图获得病毒，并于2月8日成功获得了病毒。他从13岁的学生戴维·埃德蒙斯顿(David Edmonston)身上采集了含有病毒的血液。最终，收集到的麻疹病毒将被分离出来，并用于制造一系列疫苗。

莫里斯·希勒曼和尤金·布耶纳克分离出风疹病毒伯努瓦株。他们希望开发一种灭活病毒疫苗，但最终放弃了这个想法，转而开发一种减毒病毒疫苗。